Record Details

EXPERIENCE OF PERFUSION RECELLULARIZATION OF BIOLOGICAL LUNG SCAFFOLD IN RATS

Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs

View Archive Info
 
 
Field Value
 
Title EXPERIENCE OF PERFUSION RECELLULARIZATION OF BIOLOGICAL LUNG SCAFFOLD IN RATS
ОПЫТ ПЕРФУЗИОННОЙ РЕЦЕЛЛЮЛЯРИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКОГО КАРКАСА ЛЕГКИХ КРЫСЫ
 
Creator E. Kuevda V.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
E. Gubareva A.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
A. Sotnichenko S.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
I. Gumenyuk S.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
I. Gilevich V.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University;
Scientific Research Institution – S.V. Ochapovsky Regional Clinical Hospital № 1
I. Polyakov S.; Scientific Research Institution – S.V. Ochapovsky Regional Clinical Hospital № 1
V. Porhanov A.; Scientific Research Institution – S.V. Ochapovsky Regional Clinical Hospital № 1
S. Alekseenko N.; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
P. Macchiarini ; International Research, Clinical and Education Center of Regenerative Medicine,
Kuban State Medical University
Е. Куевда В.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
Е. Губарева А.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
А. Сотниченко С.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
И. Гуменюк С.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
И. Гилевич В.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет;
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени профессора С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
И. Поляков С.; ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени профессора С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
В. Порханов А.; ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени профессора С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
С. Алексеенко Н.; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
П. Маккиарини ; Международный научно-исследовательский клинико-образовательный центр регенеративной медицины, Кубанский государственный медицинский университет
 
Subject decellularization;recellularization;rat tissue-engineered lungs
децеллюляризация;рецеллюляризация;тканеинженерные легкие крысы
 
Description Aim. The main aim of our research is to evaluate the process of rat lung decellularization and recellularization as the initial step of tissue-engineered organs creation.Materials and methods. Rat lung decellularization was performed by perfusion with detergents and enzymes with concomitant atmospheric air ventilation through the trachea. The quality of decellularization was analyzed with routine histological and immunohistochemical staining techniques, DNA content was determined quantitatively by spectrophotometer. For static and whole organ reseeding as a model of cells’ behavior mesenchymal multipotent stromal cells were used. Recellularization was followed by assessment of the cellular metabolic activity by colorimetric method; cell viability was analyzed by calcein and ethidium homodimer staining. Matrix qualitative evaluation after recellularization was performed using immunohistochemical staining methods.Results. 92% of allogeneic DNA was eliminated after decellularization. Histological staining revealed no residual cells and cell nuclei; preservation of the fibers of extracellular matrix was confirmed by immunohistochemical staining for laminin, elastin, fibronectin, collagen types I and IV before and after decellularization. The scaffold does not exhibit toxic properties after reseeding; cell viability and metabolic activity were proved after cultivation.Conclusion. The experience of rat lung decellularization and recellularization can be the prospective basis for protocols of organ recellularization and tissue engineered lungs creation.
Цель исследования – оценить перспективы использования процессов децеллюляризации и рецеллюляризации легких крысы как начального этапа создания тканеинженерных конструкций.Материалы и методы. Децеллюляризацию легких крысы выполняли перфузионным детергент-энзиматическим методом при сопутствующей вентиляции трахеи атмосферным воздухом. Качество проведенной децеллюляризации оценивали с использованием рутинных гистологических и иммуногистохимических методов исследования, количественное содержание ДНК определяли спектрофотометрически. Для статической рецеллюляризации и перфузионной рецеллюляризации целого органа в качестве модели для изучения поведения клеток на каркасе использовали мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки с последующей оценкой метаболической активности клеток колориметрическим методом и их жизнеспособности – путем окрашивания кальцеином и гомодимером этидия. Для качественной оценки матрикса легких после рецеллюляризации использовали иммуногистохимический анализ.Результаты. 92% аллогенной ДНК удалено при проведении децеллюляризации. Гистологическое окрашивание не выявило остаточных клеток и клеточных ядер при сохранности волокон внеклеточного матрикса, что подтверждалось иммуногистохимической реакцией матрикса с антителами к ламинину, эластину, фибронектину, коллагенам I и IV типов до и после проведения децеллюляризации. Каркас при заселении клетками не проявляет токсических свойств, поддерживает жизнеспособность и метаболическую активность клеток.Заключение. Полученный опыт децеллюляризации и рецеллюляризации легких крысы является перспективной основой для разработки протоколов создания тканеинженерных легких.
 
Publisher V.I.Shumakov Federal Research Center of Transplantology and Artificial Organs
 
Contributor —
государственное задания Министерства здравоохранения Российской Федерации
 
Date 2016-04-16
 
Type info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
—
—
 
Format application/pdf
 
Identifier http://journal.transpl.ru/vtio/article/view/617
10.15825/1995-1191-2016-1-38-44
 
Source Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs; Том 18, № 1 (2016); 38-44
Вестник трансплантологии и искусственных органов; Том 18, № 1 (2016); 38-44
2412-6160
1995-1191
10.15825/1995-1191-2016-1
 
Language rus
 
Relation http://journal.transpl.ru/vtio/article/view/617/525
 
Rights Authors who publish with this journal agree to the following terms:Authors retain copyright and grant the journal right of first publication with the work simultaneously licensed under a Creative Commons Attribution License that allows others to share the work with an acknowledgement of the work's authorship and initial publication in this journal.Authors are able to enter into separate, additional contractual arrangements for the non-exclusive distribution of the journal's published version of the work (e.g., post it to an institutional repository or publish it in a book), with an acknowledgement of its initial publication in this journal.Authors are permitted and encouraged to post their work online (e.g., in institutional repositories or on their website) prior to and during the submission process, as it can lead to productive exchanges, as well as earlier and greater citation of published work (See The Effect of Open Access).
Авторы, публикующие в данном журнале, соглашаются со следующим:Авторы сохраняют за собой авторские права на работу и предоставляют журналу право первой публикации работы на условиях лицензии Creative Commons Attribution License, которая позволяет другим распространять данную работу с обязательным сохранением ссылок на авторов оригинальной работы и оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы сохраняют право заключать отдельные контрактные договорённости, касающиеся не-эксклюзивного распространения версии работы в опубликованном здесь виде (например, размещение ее в институтском хранилище, публикацию в книге), со ссылкой на ее оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы имеют право размещать их работу в сети Интернет (например в институтском хранилище или персональном сайте) до и во время процесса рассмотрения ее данным журналом, так как это может привести к продуктивному обсуждению и большему количеству ссылок на данную работу (См. The Effect of Open Access).