Record Details

THE IMMUNOCOMPETENT CELLS RECEPTORS RESEARCH UNDER EXPERIMENTAL INFLUENZA INFECTION IN VITRO

Medical Immunology

View Archive Info
 
 
Field Value
 
Title THE IMMUNOCOMPETENT CELLS RECEPTORS RESEARCH UNDER EXPERIMENTAL INFLUENZA INFECTION IN VITRO
ИССЛЕДОВАНИЕ IN VITRO ИНТЕРФЕРОНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ
 
Creator A. Lisakov N.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
F. Nagieva G.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
E. Barkova P.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
L. Gaiderova A.; Research Center for Expertise of Means Medical Application, Moscow, Russian Federation
A. Fedotov Y.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
V. Nikulina G.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
M. Gavrilova V.; Research Institute Vaccine and Serum named after I.I. Mechnikov, Moscow, Russian Federation
А. Лисаков Н.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
Ф. Нагиева Г.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
Е. Баркова П.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
Л. Гайдерова А.; ФГБНУ НЦ экспертизы средств медицинского применения МЗ РФ, Москва, Россия
А. Федотов Ю.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
В. Никулина Г.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
М. Гаврилова В.; ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
 
Subject mononuclear cells;peripheral blood;lymphocyte activation;cultivation in vitro;influenza viruses;interferon receptors;receptors expression;flow cytometry
мононуклеарные клетки;периферическая кровь;активация лимфоцитов;культивирование in vitro;вирусы гриппа;интерфероновые рецепторы;экспрессия рецепторов;проточная цитометрия
 
Description Introduction. It is known that interferon is a cytokine and is a substantial part of the immune system necessary for antigenic challenge immune response full expression. Also it is considered that every antigen is an interferon inducer. Interferon induces antivirus response via binding to specific receptors, this receptors can be revealed straight on cell membranes of immune cells. Research objective. To evaluate the interferon inducer ability of some Influenza A virus strains upon indications of receptors functional activity (capacity) to alpha and gamma interferons on peripheral mononuclear blood cells (PBMC) induced in vitro by different Influenza A virus strains. Material and methods. The method is based on lymphocytes separation from the venous heparinized blood, with followed by in vitro lymphocytes inducing at temperature 36.5°С in the presence of 5% CO2. Blood samples were taken in different time intervals, labelled by mouse anti-idiotipyc FITCconjugated antibodies, structurally simulated human alpha and gamma interferon, samples were fixed with paraformaldehyde. Interferon receptors expression were performed by flow cytometer. Results. The in vitro experiments have determined the interferon-inducing ability of three influenza virus strains: A/PR8/34 (H1N1), A/Krasnodar/101/59 (H2N2) and A/ Ryazan/6103/87 (H3N2). MPBC blood sample (blood group was 0, Rh factor – positive) was induced by irradiated noninfectious allantoic fluid with hemagglutinating activity. Expression of alpha and gamma interferon receptors (alpha and gamma IFNR) on MPBC was determined by IFNR markers labelled with FITC and it (expression) was estimated by flow cytometer. In parallel we compared expression of alpha and gamma IFNR on MPBC in primed and non primed cells by low doses of human alpha interferon. It was found that expression of alpha and gamma IFNR on MPBC, induced influenza A/ PR8/34 (H1N1) antigen, with high hemagglutinating activity was higher in primed MPBC in comparison with non primed and higher then expression was induced by influenza virus A/Krasnodar/101/59 (H2N2) and A/Ryazan/6103/87 (H3N2) with lower hemagglutinating activity. It should be noted that IFN alpha receptor (IFNAR) expression on induced by influenza virus strain A/PR8/34 (H1N1) and primed by low doses of alpha interferon, repose on high level from induction point (1 hour) and protract during high level during 5 hours. Evaluation of gamma IFNR (IFNGR) expression level on MPBC induced by different influenza virus strains testify that firstly up-regulation IFNGR expression on MPBC primed by low doses of alpha interferon is absent and secondly up-regulation IFNGR on MPBC bear no relation with hemagglutinating activity of Influenza virus antigen. Conclusion. Experiment results clearly suggest that all influenza strains used carry the interferon induced ability which is possible to see by expression of IFNAR and IFNGR on MPBC induced by described above virus antigens. Rate of interferon induce ability in different influenza virus A connected on one side with virus hemagglutinating activity level in estimating IFNAR and on the other side with virus strains in estimating IFNGR. 
Введение. Известно, что интерферон (IFN), представляющий собой цитокин, является важной частью иммунной системы и необходим для полного выражения иммунного ответа на антигенный стимул. Также считается, что каждый антиген является интерфероногеном. В связи с тем, что интерфероны индуцируют антивирусное состояние посредством связывания со специфическими рецепторами, то эти рецепторы можно определять непосредственно на клеточных мембранах иммунокомпетентных клеток человека. Цель. Оценить интерфероногенность некоторых серотипов вирусов гриппа А по показателям функциональной активности αи γ-интерфероновых рецепторов (IFNAR и IFNGR) на мононуклеарных клетках периферической крови человека (МКПК), индуцированных in vitro вирусами гриппа А различных серотипов. Материалы и методы. Метод основан на выделении лимфоцитов из венозной гепаринизированной крови человека, индуцировании лимфоцитов in vitro при 36,5°С в атмосфере 5% СО2, забора образцов в различные временные интервалы, окраске их ФИТЦ-конъюгатом на основе мышиных антиидиотипических антител, структурно имитирующих IFNα и IFNγ человека, то есть антирецепторных антител для IFNα и IFNγ человека, фиксировании окрашенных образцов параформальдегидом и оценке показателей экспрессии интерфероновых рецепторов (IFNR) на проточном цитометре. Результаты. В экспериментах in vitro выявляли интерфероногенность трех серотипов вируса гриппа А/ PR8/34 (H1N1), Краснодар/101/59 (H2N2) и Рязань/6103/87 (H3N2). Мононуклеарные клетки периферической крови (МПК) донора с группой крови «0», резус плюс, индуцировали облученной неинфекционной аллантоисной жидкостью с гемагглютинирующей активностью. Экспрессию IFNAR и IFNGR на МПК выявляли с помощью маркеров IFNR человека, меченых флуоресцеинизотиоцианатом и оценивали в проточном цитофлуориметре. Паралельно сравнивали экспрессию IFNAR и IFNGR на МПК, праймированных и непраймированных малыми дозами IFNα человека. Было установлено, что экспрессия IFNAR на МПК, индуцированных антигеном вируса гриппа А/PR8/34 (H1N1) c высокой гемагглютинирующей активностью была выше у праймированных МПК в сравнении с непраймированными и выше в сравнении с экспрессией IFNAR на МПК, индуцированных антигенами вирусов гриппа А/Краснодар/101/59 (H2N2) и А/Рязань/6103/87 (H3N2) c более низкой гемагглютинирующей активностью. Необходимо отметить, что экспрессия IFNAR на МПК, индуцированных антигеном вируса гриппа А/PR8/34 (Н1N1) и праймированных малыми дозами IFNα, держалась на высоком уровне, начиная с 1 часа с момента индукции антигеном и продолжалась на высоких цифрах в течение 5 часов. Анализ уровня экспрессии IFNGR на МПК, индуцированных антигенами вируса гриппа А различных серотипов показал, что, во-первых, усиление экспрессии IFNGR на МПК, праймированных низкими дозами IFNα не происходило. Во-вторых, усиление экспрессии IFNGR на МПК не было связано с уровнем гемагглютинирующей активности антигенов вирусов гриппа А. Выводы. Результаты экспериментов однозначно показывают, что все использованные в работе серотипы вирусов гриппа А обладают интерфероногенностью, о чем косвенно можно судить по уровню экспрессии IFNAR и IFNGR на МПК, индуцированных указанными вирусными антигенами. Степень интерфероногенности у различных серотипов вируса гриппа А связана с одной стороны, с уровнем гемагглютинирующей активности вируса при оценке IFNAR, с другой стороны, с серотипами вирусов при оценке IFNGR.  
 
Publisher Publishing house of Saint Petersburg Pasteur Institute
 
Contributor —
—
 
Date 2015-11-30
 
Type info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
—
—
 
Format application/pdf
 
Identifier http://iimmun.ru/iimm/article/view/332
10.15789/2220-7619-2015-3-273-278
 
Source Russian Journal of Infection and Immunity; Том 5, № 3 (2015); 273-278
Инфекция и иммунитет; Том 5, № 3 (2015); 273-278
2313-7398
2220-7619
10.15789/2220-7619-2015-3
 
Language rus
 
Relation http://iimmun.ru/iimm/article/view/332/252
 
Rights Authors who publish with this journal agree to the following terms:Authors retain copyright and grant the journal right of first publication with the work simultaneously licensed under a Creative Commons Attribution License that allows others to share the work with an acknowledgement of the work's authorship and initial publication in this journal.Authors are able to enter into separate, additional contractual arrangements for the non-exclusive distribution of the journal's published version of the work (e.g., post it to an institutional repository or publish it in a book), with an acknowledgement of its initial publication in this journal.Authors are permitted and encouraged to post their work online (e.g., in institutional repositories or on their website) prior to and during the submission process, as it can lead to productive exchanges, as well as earlier and greater citation of published work (See The Effect of Open Access).
Авторы, публикующие в данном журнале, соглашаются со следующим:Авторы сохраняют за собой авторские права на работу и предоставляют журналу право первой публикации работы на условиях лицензии Creative Commons Attribution License, которая позволяет другим распространять данную работу с обязательным сохранением ссылок на авторов оригинальной работы и оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы сохраняют право заключать отдельные контрактные договорённости, касающиеся не-эксклюзивного распространения версии работы в опубликованном здесь виде (например, размещение ее в институтском хранилище, публикацию в книге), со ссылкой на ее оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы имеют право размещать их работу в сети Интернет (например в институтском хранилище или персональном сайте) до и во время процесса рассмотрения ее данным журналом, так как это может привести к продуктивному обсуждению и большему количеству ссылок на данную работу (См. The Effect of Open Access).