Record Details

HUMAN PAPILLOMA VIRUS IMMUNOGEN CREATION ON THE BASE OF CHIMERIC RECOMBINANT PROTEIN L2E7

Medical Immunology

View Archive Info
 
 
Field Value
 
Title HUMAN PAPILLOMA VIRUS IMMUNOGEN CREATION ON THE BASE OF CHIMERIC RECOMBINANT PROTEIN L2E7
СОЗДАНИЕ ИММУНОГЕНА ПРОТИВ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА НА ОСНОВЕ ХИМЕРНОГО РЕКОМБИНАНТНОГО БЕЛКА L2E7
 
Creator I. Malakhov S.; Institute of Highly Pure Biopreparations, St. Petersburg, Russia
R. Al-Shehadat I.; Institute of Highly Pure Biopreparations, St. Petersburg, Russia
I. Duckhovlinov V.; Institute of Highly Pure Biopreparations, St. Petersburg, Russia
A. Simbirtsev S.; Institute of Highly Pure Biopreparations, St. Petersburg, Russia
И. Малахов С.; ФГУП Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
Р. Аль-Шехадат И.; ФГУП Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
И. Духовлинов В.; ФГУП Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
А. Симбирцев С.; ФГУП Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА России, Санкт-Петербург, Россия
 
Subject HPV vaccine; papilloma; human papillomavirus; L2 protein; E7 protein; folding
вакцина ВПЧ; папиллома; вирус папилломы человека; белок L2; белок E7; фолдинг
 
Description The cervical cancer is one of the most common diseases in world. This malignancy is the seventh highest prevalence oncological disease worldwide and the second highest prevalence oncological disease of women in the world. Meanwhile women need to be infected by human papilloma virus (HPV) is absolutely necessary for it further evolution, HPV DNA was found in 99.97% cases of disease. Except cervical cancer, HPV cause 85% of rectal cancer, 50% of the vulva, vagina and penis cancers, 20% of oropharyngeal cancer and 10% of larynx and esophagus cancers. In 2009, 14 000 women were diagnosed with cervical cancer in Russia. The growth in morbidity was 19% (in comparison with 1999). The most effective recognised measure for almost each infection prophylaxis is a vaccination. Two human papilloma virus vaccines are available in Russia nowadays — Gardasil and Cervarix, produced in Belgium and the Netherlands respectively. Cervarix is a bivalent vaccine based on virus-like particles (VLP) of two types. Recombinant major capsid proteins L1 HPV 16 and HPV 18 express in baculovirus expression system and self-assembled into virus-like particles (about 70 percent of cervical cancers are caused by HPV 16 and HPV 18). VLP of each strain produced in different baculovirus vectors and then combined in single drug. Gardasil is like Cervarix with few exceptions. Producing organisms are fungi S. cerevisiae in this case, and this vaccine contains low-risk HPV 6 and HPV 11 VLP. Thus, Gardasil is quadrivalent HPV-6/11/16/18 vaccine. These vaccines are very effective in averting infection of disease and don’t have significant side-effects, however they have some disadvantages. Firstly, they have a high price because of necessity of their expression in eukaryotic cells. Secondly, they are strain-specific, so vaccines are completely effective only for virus’s strains which are represented in the vaccine. Thirdly, it`s the absence of therapeutic (treatment of established infection) value of stated vaccines. According to information from literature, N-terminus of the L2 protein can induce non strain-specific neutralizing antibody that protects organism from papillomavirus challenge. E7 protein is a virus oncogene, its function is unlimited proliferation of infected cells that cause malignization in chronic course of disease. This protein is a very attractive target for therapeutic vaccines because of its necessity both for virus life cycle and sustenance of malignant phenotype in cancer cells. So, in this research the design of immunogen on the base of proteins HPV L2 and E7 is selected, vaccine on the base of which will avoid the disadvantages of Gardasil and Cervarix listed above. The stain-producer of protein on the base of cells E. coli was created. The protein was purified in denaturing reducing conditions by metal-affine chromatography and refold by sequential remove of urea and 2-mercaptoethanol.
Рак шейки матки является одним из наиболее распространенных видов новообразований, занимая 7 место в мире среди всех злокачественных опухолей, и вторым по распространенности онкологическим заболеванием у женщин. Необходимым условием развития рака шейки матки является наличие в клетке ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ): ДНК ВПЧ найдено в 99,7% случаев заболевания. Помимо рака шейки матки, ДНК ВПЧ обнаружено в 85% случаев рака прямой кишки, 50% рака вульвы, вагины и пениса, 20% ротоглоточного рака и 10% гортани и рака пищевода. В России количество женщин, вновь заболевших раком шейки матки в 2009 г., составляет 14 000 человек. По сравнению с 1999 г. рост заболеваемости населения составил 19%. Наиболее эффективной мерой в профилактике практически любой инфекции признана вакцинация. В настоящее время в России доступны две вакцины (Церварикс и Гардасил) против вируса папилломы человека, производимые в Бельгии и Нидерландах соотвественно. Церварикс представляет собой бивалентную вакцину, состоящую из вирусоподобных частиц, образуемых при самосборке капсидного вирусного белка L1 ВПЧ типа 16 и 18 (онкогенные штаммы вируса, найденные примерно у 70% больных раком шейки матки). В этом препарате белок L1 ВПЧ экспрессируется в рекомбинантном бакуловирусном векторе; вируспоподобные частицы каждого вирусного штамма производятся отдельно и затем объединяются в один препарат. Гардасил аналогичен Цервариксу, однако в качестве продуцентов используются дрожжи S. cerevisiae, и в препарат добавлены вирусоподобные частицы вирусов папилломы человека неонкогенных типов 6 и 11. Таким образом Гардасил является квадривалентной ВПЧ-6/11/16/18 вакциной. Эти вакцины весьма эффективны в предотвращении инфицирования вирусом и не имеют значимых побочных эффектов, однако они обладают и рядом минусов. В первую очередь это высокая стоимость из-за необходимости их экспрессии в эукариотических клетках. Во-вторых, это их штаммоспецифичность, из-за которой вакцины полностью эффективны только против штаммов вируса, представленных в вакцине. В-третьих, это отсутствие терапевтической (лечение уже установившейся инфекции) ценности данных вакцин. В литературе показано, что N-конец вирусного белка L2 способен генерировать нештаммоспецифичные нейтрализующие антитела, блокирующие проникновение вируса в клетку. Белок Е7 является вирусным онкогеном, отвечающим за неконтролируемую пролиферацию зараженных клеток, что в хронических случаях приводит к опухолевой трансформации. Этот белок по причине своей незаменимости, как для жизненного цикла вируса, так и для поддержания опухолевого фенотипа раковых клеток, является привлекательной целью терапевтической вакцины. Таким образом, недостатков Гардасила и Церварикса была бы лишена вакцина на основе белков L2 и E7 вируса папилломы человека. Создан штамм-продуцент белка на основе клеток E. coli, белок очищен в восстановительных денатурирующих условиях металлоаффинной хроматографией и рефолдирован путем последовательного удаления мочевины и меркаптоэтанола.
 
Publisher Publishing house of Saint Petersburg Pasteur Institute
 
Contributor —
—
 
Date 2017-01-05
 
Type info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
—
—
 
Format application/pdf
 
Identifier http://iimmun.ru/iimm/article/view/446
10.15789/2220-7619-2016-4-345-352
 
Source Russian Journal of Infection and Immunity; Том 6, № 4 (2016); 345-352
Инфекция и иммунитет; Том 6, № 4 (2016); 345-352
2313-7398
2220-7619
10.15789/2220-7619-2016-4
 
Language rus
 
Relation http://iimmun.ru/iimm/article/view/446/300
 
Rights Authors who publish with this journal agree to the following terms:Authors retain copyright and grant the journal right of first publication with the work simultaneously licensed under a Creative Commons Attribution License that allows others to share the work with an acknowledgement of the work's authorship and initial publication in this journal.Authors are able to enter into separate, additional contractual arrangements for the non-exclusive distribution of the journal's published version of the work (e.g., post it to an institutional repository or publish it in a book), with an acknowledgement of its initial publication in this journal.Authors are permitted and encouraged to post their work online (e.g., in institutional repositories or on their website) prior to and during the submission process, as it can lead to productive exchanges, as well as earlier and greater citation of published work (See The Effect of Open Access).
Авторы, публикующие в данном журнале, соглашаются со следующим:Авторы сохраняют за собой авторские права на работу и предоставляют журналу право первой публикации работы на условиях лицензии Creative Commons Attribution License, которая позволяет другим распространять данную работу с обязательным сохранением ссылок на авторов оригинальной работы и оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы сохраняют право заключать отдельные контрактные договорённости, касающиеся не-эксклюзивного распространения версии работы в опубликованном здесь виде (например, размещение ее в институтском хранилище, публикацию в книге), со ссылкой на ее оригинальную публикацию в этом журнале.Авторы имеют право размещать их работу в сети Интернет (например в институтском хранилище или персональном сайте) до и во время процесса рассмотрения ее данным журналом, так как это может привести к продуктивному обсуждению и большему количеству ссылок на данную работу (См. The Effect of Open Access).